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Gene therapy of tyrosine hydroxylase, aromatic L-amino acid decarboxylase,and GTP cyclohydrolase genes in rat model of Parkinson's disease
Author(s): 
Pages: 1528-1532
Year: Issue:  18
Journal: NATIONAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA

Keyword:  帕金森病基因疗法原位杂交基因转移技术;
Abstract: 目的探讨重组多巴胺合成酶基因在体内外的表达、生成蛋白的活性及对帕金森病模型大鼠的治疗作用.方法在腺相关病毒介导下,将多巴胺合成酶相关基因酪氨酸羟化酶(TH)基因、芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因与GTP环化水解酶Ⅰ(GCH-Ⅰ)基因导入COS7细胞,分别通过原位杂交与免疫组化的方法检测目的基因的转录与表达,通过高压液相分析检测酶活性.将携带目的基因的运载细胞移植到帕金森病模型大鼠纹状体,每周进行诱发旋转行为的检测.10周后高压液相分析脑内多巴胺含量,以进一步评估复合基因的治疗效果.结果重组多巴胺合成酶基因在体外可以表达并被正确修饰,具有联合酶促催化功能.当把表达TH、AADC与GCH-Ⅰ基因的细胞共培养时,在底物左旋酪氨酸存在的情况下,可以生成大量多巴胺.而且,把携带治疗基因的细胞移植到大脑后,经检测三基因移植组脑内多巴胺的生成量较单基因移植组多,且前者与后者相比,其行为学改善更为明显.但是三基因移植组与双基因组相比,脑内多巴胺生成量差异无显著意义.结论在帕金森病基因治疗策略中,应根据多巴胺能神经元的损伤程度来选择加入基因的组合量.复合基因治疗的效果明显好于单基因.
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