Effective elimination of fibroblasts in cultures of hair follicle amelanotic melanocytes and effect of components in culture medium on the cells
Author(s): WANG Daguang, ZHU Wenyuan, MA Huijun, ZHANG Ruzhi
Pages: 80-83
Year: 2004 Issue: 2
Journal: JOURNAL OF CLINICAL DERMATOLOGY
Keyword: 无色素黑素细胞; 毛囊; geneticin; 12-O-十四烷佛波酯-13-醋酸酯; 角质形成细胞无血清培养基; 增殖;
Abstract: 目的:研究geneticin在毛囊黑素细胞培养过程中对成纤维细胞的去除作用,研究12-O-十四烷佛波酯-13-醋酸酯(TOPA)和含牛垂体提取物(BPE)角质形成细胞无血清培养基(K-SFM)对毛囊无色素黑素细胞(AMMC)形态和增殖的影响.方法:通过胶原酶法培养毛囊黑素细胞,观察不同浓度geneticin对污染的成纤维细胞的去除.同时观察不同浓度TPA和含BPE的KSFM对AMMC形态和促增殖的影响.结果:采用100μg/mL geneticin处理2 d后,剩余细胞主要是黑素细胞,其中部分成纤维细胞呈死亡状态,继续培养至第7天后,黑素细胞的纯度达到90%以上.50ng/mLTPA可以促进细胞增殖,与100ng/mLTPA比较差异无显著性(P＞0.05),但对细胞形态影响不大;100ng/mLTPA明显促进黑素细胞的树突增加.含20%、40%和80%的K-SFM(含BPE)培养基中,浓度为80%时促增殖作用最明显.结论:100μg/mLgeneticin作用2 d去除黑素细胞培养中污染的成纤维细胞是一种简单有效的方法,并可重复使用.在毛囊黑素细胞培养中,TPA以50 ng/mL的浓度即可明显促进增殖,而不影响细胞的形态.含BPE的K-SFM可以浓度依赖性地促进AMMC增殖.
Pages: 80-83
Year: 2004 Issue: 2
Journal: JOURNAL OF CLINICAL DERMATOLOGY
Keyword: 无色素黑素细胞; 毛囊; geneticin; 12-O-十四烷佛波酯-13-醋酸酯; 角质形成细胞无血清培养基; 增殖;
Abstract: 目的:研究geneticin在毛囊黑素细胞培养过程中对成纤维细胞的去除作用,研究12-O-十四烷佛波酯-13-醋酸酯(TOPA)和含牛垂体提取物(BPE)角质形成细胞无血清培养基(K-SFM)对毛囊无色素黑素细胞(AMMC)形态和增殖的影响.方法:通过胶原酶法培养毛囊黑素细胞,观察不同浓度geneticin对污染的成纤维细胞的去除.同时观察不同浓度TPA和含BPE的KSFM对AMMC形态和促增殖的影响.结果:采用100μg/mL geneticin处理2 d后,剩余细胞主要是黑素细胞,其中部分成纤维细胞呈死亡状态,继续培养至第7天后,黑素细胞的纯度达到90%以上.50ng/mLTPA可以促进细胞增殖,与100ng/mLTPA比较差异无显著性(P＞0.05),但对细胞形态影响不大;100ng/mLTPA明显促进黑素细胞的树突增加.含20%、40%和80%的K-SFM(含BPE)培养基中,浓度为80%时促增殖作用最明显.结论:100μg/mLgeneticin作用2 d去除黑素细胞培养中污染的成纤维细胞是一种简单有效的方法,并可重复使用.在毛囊黑素细胞培养中,TPA以50 ng/mL的浓度即可明显促进增殖,而不影响细胞的形态.含BPE的K-SFM可以浓度依赖性地促进AMMC增殖.
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