Author(s): LI Zeqing, WANG Qiuping, ZHOU Wenguang, ZHOU Mei, TIAN Yongquan, XIAO Jianyun, ZHAO Suping, TAO Zhengde
Pages: 381-384
Year: 2002 Issue:  5
Journal: JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES
Keyword:  EB病毒; DNA酶; 制备; 化学诱导;
Abstract: 目的:探索EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)可靠实用的制备方法,为建立一种新的鼻咽癌(NPC)血清学诊断方法--血清EBV-DNase抗体检测奠定基础. 方法:采用TPA+正丁酸联合化学诱导的方法诱导处理P3HR-1细胞株48 h,超声破碎,离心收集上清液即得EBV-DNase粗提物.用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及放免酶活性检测法测定粗提物中的EBV-DNase. 结果:①在SDS-PAGE凝胶上,与未经诱导的粗提物相比,诱导后的粗提物有多条增强表达的蛋白质带,尤以相对分子质量为52000的蛋白质更加明显.②用放免法酶活性测定时,经诱导的粗提物CPM值及根据公式计算的每毫升酶单位(U/ml)分别>17000和40,而对照物则≤2000和4.0. 结论:联合化学诱导方法能成功地使EBV-DNase在P3HR-1细胞株中增强表达,是一种制备EBV-DNase切实可行的方法.