Development of EV71-CA16 Enterovirus Fluorescence Qualitative RT-PCR Diagnostic Kit
Author(s): CHEN Mian-qiao, YU Hao-yang, LU Qiu-mei, CHEN Li-jia, LIU Xiao-qing
Pages: 27-31
Year: 2015 Issue: 6
Journal: Journal of Modern Laboratory Medicine
Keyword: fluorescence qualitative RT-PCR; EV71; CA16 enterovirus; rapid diagnosis;
Abstract: 目的 研制一种能同时检测EV71,CA16肠道病毒的二联实时荧光定量PCR检测试剂盒,主要用于EV71,CA16肠道病毒的快速检测和流行病学监测.方法 设计特异度的EV71型、CA16型基因的引物和探针,优化实时荧光定量PCR检测体系,并研究产品的灵敏度、精密度、稳定性和检测线性范围;同时对2014年5月份收集的26份样品进行检测.结果 试验得到了阳性重组质粒,线性范围在5* 102 copies/μl～105 copies/μl,该范围内检测结果良好;优化后肠道病毒CA16上下游引物和探针浓度分别为0.48,0.24μmol/L,EV71上下游引物和探针浓度分别为0.40,0.20 μmol/L.敏感度达到500 copies/μl,重复性变异系数CV≤5％;该荧光定量PCR检测试剂盒稳定性强,在-20℃下可以保存一年,对EV71,CA16肠道病毒具有良好的特异度.用该方法检测20份临床阳性样品和6份阴性样品,阳性检出率为100％ (20/20),阴性检出率为100％(6/6).结论 试验建立的EV71,CA16肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于EV71,CA16肠道病毒的临床诊断.
Pages: 27-31
Year: 2015 Issue: 6
Journal: Journal of Modern Laboratory Medicine
Keyword: fluorescence qualitative RT-PCR; EV71; CA16 enterovirus; rapid diagnosis;
Abstract: 目的 研制一种能同时检测EV71,CA16肠道病毒的二联实时荧光定量PCR检测试剂盒,主要用于EV71,CA16肠道病毒的快速检测和流行病学监测.方法 设计特异度的EV71型、CA16型基因的引物和探针,优化实时荧光定量PCR检测体系,并研究产品的灵敏度、精密度、稳定性和检测线性范围;同时对2014年5月份收集的26份样品进行检测.结果 试验得到了阳性重组质粒,线性范围在5* 102 copies/μl～105 copies/μl,该范围内检测结果良好;优化后肠道病毒CA16上下游引物和探针浓度分别为0.48,0.24μmol/L,EV71上下游引物和探针浓度分别为0.40,0.20 μmol/L.敏感度达到500 copies/μl,重复性变异系数CV≤5％;该荧光定量PCR检测试剂盒稳定性强,在-20℃下可以保存一年,对EV71,CA16肠道病毒具有良好的特异度.用该方法检测20份临床阳性样品和6份阴性样品,阳性检出率为100％ (20/20),阴性检出率为100％(6/6).结论 试验建立的EV71,CA16肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于EV71,CA16肠道病毒的临床诊断.
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