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Anti-nasopharyngeal carcinoma effect in vivo and in vitro of Avastin and adenovirus-thymidine kinase suicide gene
Author(s): 
Pages: 526-532
Year: Issue:  7
Journal: CHINESE JOURNAL OF OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY

Keyword:  鼻咽肿瘤内皮生长因子基因疗法;
Abstract: 目的 通过体内外实验初步探讨重组人血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体Avastin和重组腺病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(adenovirus-thynidine kinase/Ganciclovir,Ad-TK/GCV)自杀基因系统在鼻咽癌治疗中的价值.方法 采用人VEGF ELISA试剂盒检测鼻咽癌CNE1细胞分泌的VEGF水平,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl terazolium,MTT)法检测Avastin和Ad-TK/GCV对CNE1细胞的抑制作用,流式细胞仪和Hoechst 33342染色法探讨其作用机制.建立CNE1细胞荷瘤裸鼠移植瘤模型,分组在裸鼠肿瘤局部注射磷酸盐缓冲液、Avastin、Ad-TK/GCV、对照Ad-Lac-Z/GCV和Ad-TK/GCV+Avastin.观察治疗后移植瘤生长情况、抑瘤率和肿瘤组织病理学改变.结果 CNE1细胞分泌VEGF;Avastin对CNE1细胞无直接作用.随着Ad-TK感染复数和前体药物浓度的增加,Ad-TK/GCV对CNE1细胞的杀伤作用逐渐增强,旁观者效应的存在增强了这种杀伤作用.流式细胞仪分析显示Ad-TK组与对照组相比,死亡细胞的比率差异有统计学意义(t值分别为30.812和41.006,P值均为0.000).Hoechst 33342染色法显示Ad-TK组与对照组相比,凋亡细胞的比率差异有统计学意义(t=47.351,P=0.000).CNE1细胞裸鼠体内实验显示Avastin组、Ad-TK/GCV组和Ad-TK/GCV+Avastin组肿瘤增长缓慢,肿瘤体积在不同时间点小于对照组(P<0.05或P=0.000);平均瘤重均明显低于对照组(P值均为0.000).病理检查示Ad-TK/GCV组、Ad-TK/GCV+Avastin组肿瘤呈片状坏死,经Avastin治疗的鼻咽癌移植瘤边缘血管生成明显减少.结论 体外实验观察到Avastin对鼻咽癌CNE1细胞无直接作用;Ad-TK/GCV系统通过引起细胞坏死和细胞凋亡杀伤CNE1细胞,旁观者效应的存在增强了自杀基因的杀伤作用.Avastin及Ad-TK/GCV自杀基因系统对鼻咽癌CNE1细胞荷瘤裸鼠移植瘤的生长有一定抑制作用,两种治疗联合产生协同作用.
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