Author(s): CHEN Hongyi ng, CHEN Zhi xi n, WANG Xi aozhong
Pages: 127-132
Year: 2013 Issue:  3
Journal: Journal of Fujian Medical University
Keyword:  viral proteins; hepatitis B virus; transforming grow th factor beta; hepatocytes; astrocytes; immediate-early proteins;
Abstract: 目的研究乙肝病毒X蛋白（HBx）对肝星状细胞（HSC）增殖的影响及其可能的分子机制。方法运用分子生物学方法构建稳定表达 H BV X 基因的 HL-7702肝细胞株（L02/x ）。RT-PCR、Western blot 鉴定L02/x细胞 H BV X基因的稳定表达。将HSC细胞分别与L02/x、转染空质粒和未转染的肝细胞共培养36 h ，分别命名为HSC/x、HSC/ctr和HSC/NC。CCK-8法检测各组HSC增殖，Real-time PCR法检测在HSC增殖中起重要作用的 TGFβ1和 CTGF基因在各组HSC中的mRNA表达。结果 RT-PCR和Western blot结果显示，L02/x细胞中有 HBV X基因mRNA和蛋白的表达。CCK-8法检测显示，HSC/x的增殖（0．7377±0．0142）显著高于HSC/ctr（0．4970±0．0085）和HSC/NC（0．4913±0．0186），差别具有统计学意义（P＜0．01）。Real-time PCR显示，HSC/x细胞中的 TGFβ1和 CTGF mRNA相对表达量（3．1461±0．0705，2．9829±0．0315）均显著高于HSC/ctr（1．0046±0．0040，1．0222±0．0627）和HSC/NC（1．0000±0．0000，1．0000±0．0000），差别具有统计学意义（P均＜0．01）。结论肝细胞中表达的 HBV X基因可以上调 HSC细胞 TGFβ1和 CTGF基因的表达，促进共培养的 HSC增殖。