Applying Multiple Displacement Amplification to DNA Typing in the Pathological Section
Author(s): ZHANG Yue, CHEN Yang, YANG Yuan-li, LI Ji-zhou, LI Chao-pin
Pages: 17-20
Year: 2013 Issue: 1
Journal: Journal of Forensic Medicine
Keyword: 法医遗传学; 冷冻切片; 多重置换扩增;
Abstract: 目的 探讨多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术应用于法医学组织病理切片DNA分型的可行性. 方法 采用重复拉丁方设计实验,按保存时间、组织类型、尸源年龄3个因素分7个水平进行随机分组,共制作98例病理切片.硅珠法制备DNA模板,对照组直接采用AmpFeSTR@IdentifilerTM试剂盒进行PCR扩增,实验组进行MDA后再进行扩增.以新鲜尸体组织的分型结果为标准,对比分析切片实验组与对照组的基因座检出数与检出率. 结果 各保存时间切片实验组与对照组的基因座检出率相比差异有统计学意义(P＜0.01)；组织切片保存时间为360d以内,实验组的16个基因座检出率均可达到95％以上.各组织类型间的差异具有统计学意义(P＜0.01),而尸源年龄组间差异无统计学意义(P＞0.01).结论 MDA可提高病理切片模板基因组量,相对降低PCR扩增抑制物浓度,减少等位基因脱扣现象,有效提高基因座检出率,MDA在法医切片DNA分型中具有运用价值,但应注意切片保存时间与组织类型等因素对分型结果的影响.
Pages: 17-20
Year: 2013 Issue: 1
Journal: Journal of Forensic Medicine
Keyword: 法医遗传学; 冷冻切片; 多重置换扩增;
Abstract: 目的 探讨多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术应用于法医学组织病理切片DNA分型的可行性. 方法 采用重复拉丁方设计实验,按保存时间、组织类型、尸源年龄3个因素分7个水平进行随机分组,共制作98例病理切片.硅珠法制备DNA模板,对照组直接采用AmpFeSTR@IdentifilerTM试剂盒进行PCR扩增,实验组进行MDA后再进行扩增.以新鲜尸体组织的分型结果为标准,对比分析切片实验组与对照组的基因座检出数与检出率. 结果 各保存时间切片实验组与对照组的基因座检出率相比差异有统计学意义(P＜0.01)；组织切片保存时间为360d以内,实验组的16个基因座检出率均可达到95％以上.各组织类型间的差异具有统计学意义(P＜0.01),而尸源年龄组间差异无统计学意义(P＞0.01).结论 MDA可提高病理切片模板基因组量,相对降低PCR扩增抑制物浓度,减少等位基因脱扣现象,有效提高基因座检出率,MDA在法医切片DNA分型中具有运用价值,但应注意切片保存时间与组织类型等因素对分型结果的影响.
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