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Mg2+ inhibits ATP-activated current mediated by rat P2X4 receptors expressed in Xenopus oocytes
Author(s): 
Pages: 75-81
Year: Issue:  1
Journal: Acta Physiologica Sinica

Keyword:  Mg2+ ATP-激活电流 爪蟾卵母细胞 双电极电压钳技术;
Abstract: 本文旨在研究Mg2+对表达在非洲爪蟾卵母细胞上P2X4受体介导的ATP-激活电流(ATP-activated current,IATP)的调制及机理。大鼠P2X4受体野生型及突变体型cDNA在体外转录成cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。应用全细胞双电极电压钳技术研究Mg2+对IATP的影响。结果显示,细胞外液加MgCl2对IATP的影响如下:(1)Mg2+在0.5~10mmol/L范围内,浓度依赖性地抑制IATP,半效抑制浓度(IC50)为(1.24±0.07)mmol/L,冲洗10min后,IATP可恢复;(2)1mmol/L的Mg2+使IATP量-效曲线右下移,最大效应电流(Emax)降低了(42.0±2.1)%,但半数有效浓度(EC50)不变;(3)预加Mg2+80s后再加ATP,Mg2+对IATP抑制效应可达最大;(4)Mg2+对IATP的抑制不受膜电位的影响;(5)以100μmol/L ATP激活的电流为对照,将P2X4受体280位的天冬氨酸突变成不带电荷的谷氨酰胺后,相同浓度的ATP诱发的IATP幅值仅为对照值的(4.12±0.15)%;将280位的天冬氨酸突变成带负电荷的谷氨酸,IATP幅值和对照值相比没有显著性差异;(6)当P2X4受体280位的天冬氨酸缺失后,100μmol/L ATP诱发的IATP的幅值几乎为对照值的两倍,且0.5~10mmol/L的Mg2+对相应的IATP无明显影响。以上结果提示:Mg2+抑制P2X4受体介导的IATP是非竞争性的、可逆的、具有浓度依赖性、时间依赖性、无电压依赖性;Mg2+的这种抑制效应可能是通过作用于P2X4受体280位的天冬氨酸而实现的。
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