Author(s): LIU Yao-bao, CAO Jun, ZHOU Hua-yun, Li Ju-lin, ZHU Guo-ding, WANG Wei-ming, GU Ya-ping, ZHU Han-wu, GAO Qi
Pages: 108-110
Year: 2009 Issue:  2
Journal: Chinese Journal of Vector Biology and Control
Keyword:  聚合酶链反应; 中华按蚊; 血源鉴定; 人血指数; 媒介调查;
Abstract: 目的 建立一种能替代传统免疫学方法用于按蚊人血指数测定的分子生物学检测技术.方法 根据人核糖体DNA序列设计1对特异性引物,建立聚合酶链反应(PCR)鉴定按蚊胃内人血的方法.同时,对猪血、牛血、羊血、小鼠血以及未吸血按蚊中提取的DNA进行检测,验证该检测方法的特异性,并对吸饲人血后不同时间(1、6、12、18、24、27、30、33、36、40、44、48 h)的按蚊进行检测,测试该方法的检测敏感性.结果 该方法可从人血提取的DNA中扩增得到519 bp大小的特异性条带,对其他动物血样及未吸血按蚊中所提取的DNA均未能扩增出特异性条带;所有吸人血24 h内的中华按蚊均能扩增出特异性条带,在吸人血后27、30、33、36 h的各5只中华按蚊中,分别有4,4、2、1只能扩出特异性条带,吸血40 h后的中华按蚊均不能扩增出特异性条带.Logistic回归分析表明,吸血后24～40 h,PCR检测阳性按蚊数与吸血后的时间呈负相关关系(P<0.01).结论 本研究所建立的PCR方法可准确鉴定吸血24 h内的中华按蚊胃内的人血液来源,可替代传统免疫学方法用于按蚊人血指数的测定.