The server is under maintenance between 08:00 to 12:00 (GMT+08:00), and please visit later.
We apologize for any inconvenience caused
Login  | Sign Up  |  Oriprobe Inc. Feed
China/Asia On Demand
Journal Articles
Laws/Policies/Regulations
Companies/Products
Bookmark and Share
Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibody of Human NANOGP8
Author(s): 
Pages: 30-35
Year: Issue:  3
Journal: China Biotechnology

Keyword:  NANOGP8Nanog表达多克隆抗体效价鉴定;
Abstract: 为获得抗人NANOGP8基因的多克隆抗体,采用PCR法扩增了NANOGP8基因,经序列测定正确后,连接到pET-28a质粒上,将获得的重组质粒pET-28a-NANOGP8转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在16℃和37℃下分别进行诱导表达,经SDS-PAGE检测发现融合蛋白以包涵体形式存在于37℃诱导表达的沉淀中,大小约为45kDa.对包涵体进行洗涤、溶解处理,经Chelating Sepharose Fast Flow亲和层析柱进行纯化.对纯化得到的蛋白进行SDS-PAGE及Western blot免疫印记杂交检测,得到了单一条带.用获得的高纯度融合蛋白免疫新西兰兔,得到兔来源的抗人NANOGP8血清.对抗血清进行蛋白免疫印记杂交反应和酶联免疫吸附反应检测,结果显示成功制备了高滴度和特异性的兔抗人NANOGP8多克隆抗体,与市售抗人Nanog多克隆抗体相比,杂交更迅速,效果更明显.为进一步研究NANOGP8基因在肿瘤发生、发展中的作用奠定了基础.
Related Articles
No related articles found