Author(s): LIU An-yuan, CHEN Lin, WAN Yan-ping, CHEN Xi, ZHU Cui-ming, YU Min-jun, CAO Qing-xiang
Pages: 12-15
Year: 2008 Issue:  1
Journal: CURRENT IMMUNOLOLGY
Keyword:  IE1蛋白; 巨噬细胞; IL-1β; TNF-α; 凋亡;
Abstract: 为了研究HCMV IE1-GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞分泌活性及其凋亡的影响,将真核表达载体pEGFP/IE1转染至巨噬细胞(Mψ),转染48 h后,用荧光显微镜观察GFP-IE1融合蛋白或GFP的表达与定位.ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β或TNF-α的含量以及用RT-PCR检测其mRNA的表达情况,并收集Mψ经PI染色后流式细胞术(FCM)检测其凋亡率.结果发现,GFP-IE1融合蛋白在Mψ内瞬时表达且定位于细胞核,GFP定位于整个细胞中.GFP-IE1融合蛋白在Mψ内瞬时高表达使Mψ分泌IL-1β和TNF-α量及其mRNA表达量均增加且Mψ凋亡率明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),而GFP表达对Mψ分泌及其凋亡无影响(P＞0.05).HCMV IE1瞬时高表达可上调Mψ分泌细胞因子IL-1β和TNF-α并促进Mψ凋亡.