Studies on Transformation of The Promoter of Phosphate Transporter Gene OsPht1;6 in Rice
Author(s): AI Peng-hui, SUN Shu-bin, HU Jiang, XU Guo-hua
Pages: 100-104
Year: 2007 Issue: 3
Journal: JOURNAL OF QUFU NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
Keyword: 磷转运蛋白; 水稻; 植物表达载体; 再生; GUS基因; 瞬时表达;
Abstract: 通过PCR从粳稻(Oryza sativa L.cv.ssp.Japonica)的总DNA中扩增出一个磷转运蛋白基因(Phosphates transporter 1;6;OsPht1;6,accession no AF536966)的启动子序列.以此为基础与二元表达载体PS1aG-3构建含Pht1;6 启动子的植物表达载体,并通过根癌农杆菌介导转化了水稻武运粳7号品种.同时,对其愈伤组织高效再生体系和影响报告基因GUS瞬时表达的各种因素也做了比较研究.结果表明: ①诱导水稻武运粳7号品种愈伤形成,3 mg/L 2,4-D的生长素浓度最适宜;② GUS基因高瞬时表达频率的条件为: 工程菌液的浓度OD600值为 0.7-0.8,浸染时间30 min,共培养时间3 d.利用这些再生转化条件,以EHA105为菌株转化浸染愈伤组织,获得了较高频率的Pht1;6 启动子驱动的GUS基因瞬时表达.这些方法都有效地提高了抗性愈伤组织的形成率,该实验获得了转基因植株,经PCR检测,证实已将目的基因整合到水稻的基因组中.
Pages: 100-104
Year: 2007 Issue: 3
Journal: JOURNAL OF QUFU NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
Keyword: 磷转运蛋白; 水稻; 植物表达载体; 再生; GUS基因; 瞬时表达;
Abstract: 通过PCR从粳稻(Oryza sativa L.cv.ssp.Japonica)的总DNA中扩增出一个磷转运蛋白基因(Phosphates transporter 1;6;OsPht1;6,accession no AF536966)的启动子序列.以此为基础与二元表达载体PS1aG-3构建含Pht1;6 启动子的植物表达载体,并通过根癌农杆菌介导转化了水稻武运粳7号品种.同时,对其愈伤组织高效再生体系和影响报告基因GUS瞬时表达的各种因素也做了比较研究.结果表明: ①诱导水稻武运粳7号品种愈伤形成,3 mg/L 2,4-D的生长素浓度最适宜;② GUS基因高瞬时表达频率的条件为: 工程菌液的浓度OD600值为 0.7-0.8,浸染时间30 min,共培养时间3 d.利用这些再生转化条件,以EHA105为菌株转化浸染愈伤组织,获得了较高频率的Pht1;6 启动子驱动的GUS基因瞬时表达.这些方法都有效地提高了抗性愈伤组织的形成率,该实验获得了转基因植株,经PCR检测,证实已将目的基因整合到水稻的基因组中.
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